分子生物实验室可分为样品保存、样品前处理、过程分析、清洗灭菌四个流程,不同的工作流程需要不同的仪器,分子生物实验室常用的仪器设备有:
一、样品保存
1、 超低温冰箱:低温保存疫苗、菌种、生物样本等
2、 液氮罐:长期活性保存疫苗、菌毒种、细胞
3、 药品冷藏箱:用于冷藏保存药品、试剂、生物制品和疫苗
二、样品前处理
1、 移液器:定量转移液体的器具
2、 离心机: 液固或液液颗粒分离
3、 冻干机: 冻结的水分子直接升华水蒸气
4、 均质仪: 提取样品中DNA/RNA/蛋白质
5、 培养箱: 培养微生物、植物和动物细胞
6、 生物安全柜: 实验操作中空气净化负压安全装置
7、 超净工作台: 局部工作区域洁净度
三、过程分析
1、 PCR仪:用于传染病的诊断、基因复制以及亲子鉴定
2、 酶标仪:酶联免疫吸附试验的专用仪器
3、 核酸提取仪:核酸提取试剂自动完成样本核酸提取
4、 暗箱式紫外分析仪:于核酸、蛋白电泳凝胶,薄层层板结果的观察分析
5、 电泳仪:用于DNA 测序
四、清洗灭菌
1、 高压灭菌锅:实验前后杀菌
2、超声波清洗机:清洗实验器具及玻璃器皿
清洁pcr仪的反应槽和热盖,最好使用
二者结果相同。都能说明生物体外的特殊DNA复制的整个过程的扩增效率和溶解温度情况。
区别:
1、二者系统组成不同
荧光定量PCR仪比普通的PCR仪多了荧光信号采集系统和计算机分析处理系统。
2、二者原理不同
荧光定量PCR实时监测与DNA结合的荧光染料激发的荧光,普通OCR通过检测插入DNA中核算染料的量来测定PCR最终产物量。
3、二者反应要求不同
荧光定量PCR对扩增片段有较高的要求,一般为100-300bp,普通PCR可以扩增长点的片段。
4、二者应用不同
荧光定量PCR主要是用来定量分析和确定基因转录水平的,普通的PCR仪是做定性分析和扩增基因片段,定量PCR仪可以做普通PCR仪的工作,反之不行。
5、二者测量成本不同
定量PCR仪价格较为昂贵,普通的基因扩增仪(PCR仪)只能够定性地分析是否存在目标片段。但是价格要低很多,而且运行成本也要低很多。
实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限,实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度,并记录在电脑软件之中,通过对每个样品Ct值的计算,根据标准曲线获得定量结果。
PCR仪的热盖大致可以分为以下四种:非可调式热盖、可调节式热盖、自适应式热盖和自动式热盖
1、非可调式热盖:即热盖并不能同时适用于高管和矮管,如AB的2720等只能用高管,用矮管得手工加铝块;
2、可调节式热盖:即热盖的高度可以手工调节,同时适用于各种高管和矮管,但压力需要自己感觉,用力过小或过大都可能会有麻烦,如MJ公司的PTC200。因为有这个问题,后来又出了力矩式可调热盖,即热盖旋转到一定力矩后内置机构打滑,从而保证一定的热盖压力。如东胜龙的黑金刚以及Biometra等。这类热盖打开前最好旋松热盖,否则下一个用户如果直接下压热盖,可能造成部分PCR管变型。但很多用户会忘记松热盖。
3、自适应式热盖:即热盖自带预压紧的弹簧,通过与打开和关闭热盖的手柄机构相结合,达到压手柄时自动压紧热盖,开手柄时自动松开热盖,自适应高管和矮管,不用担心压力和没有松开热盖等问题。如东胜龙二代的ETC811型PCR仪。
4、自动式热盖:即热盖是由电机来控制的压紧与松开的。一般用于与实验室自动化相配合的PCR仪,或称为全自动PCR仪,如原MJ公司以及Biometra公司都此类PCR仪,但价格都较高。
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