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氢细菌是利用氢气作为电子供体,将二氧化碳还原为有机物的一类细菌。能够利用分子态氢和氧之间的反应所产生的能,并以碳酸作唯一碳源而生长的细菌。若给与有机物又能作为异养生物而生长,因而它是兼性化能自养细菌。以往曾把它归于氢单胞菌属,现今已被记载为假单胞菌属(敏捷假单胞菌、嗜糖假单胞菌)、产碱菌属(真养产碱菌、争沦产碱菌)中的若干种,以及副球菌属(脱氮微球菌)和放线菌中的若干种(Noca-rdia saturnea等)。
详情介绍
氢细菌是利用氢气作为电子供体,将二氧化碳还原为有机物的一类细菌。能够利用分子态氢和氧之间的反应所产生的能,并以碳酸作唯一碳源而生长的细菌。若给与有机物又能作为异养生物而生长,因而它是兼性化能自养细菌。以往曾把它归于氢单胞菌属,现今已被记载为假单胞菌属(敏捷假单胞菌、嗜糖假单胞菌)、产碱菌属(真养产碱菌、争沦产碱菌)中的若干种,以及副球菌属(脱氮微球菌)和放线菌中的若干种(Noca-rdia saturnea等)。
- 拉丁学名
- hydrogen bacteria
- 界
- 细菌界
- 中文学名
- 氢细菌
- 应用方向
- 水体硝酸盐的处理
氢细菌菌种介绍
作为氧化分子态氢时的末端电子受体,除氧以外,还往往利用硝酸盐(上述脱氮副球菌)、硫酸盐(硫酸盐还原细菌)、二氧化碳(甲烷细菌)等。但是,硫酸盐还原细菌等却不能随此反应而固定二氧化碳。分子态氢虽然可被氢化酶而活化,但在氢细菌中这种酶有的以可溶性直接还原NAD;有的为膜结合性的,而不直接还原NAD的。至于从氢往氧的电子传递途径中,也尚未得到一致的见解。
氢细菌菌种分类
氢细菌尽管都以氢气为电子供体,但电子受体却不尽相同,有氧气,硝酸盐,硫酸盐,二氧化碳等,产物不同,应用也不尽相同。在这里,将氢细菌按电子受体的不同,简单分为四类。
氢细菌筛选培养
氢细菌菌种筛选
氢细菌在化能自养微生物中是生长最快的一种,利用其自养以及对氢的利用可以对菌种进行筛选。总结起来需要注意以下几点:不加入有机碳源,向含有必要营养元素的培养基中通入二氧化碳,氢气混合气体;视需要而定通入氧气,加入硝酸盐、硫酸盐等;培养菌种选择土壤浸出液;使用气象色谱对初筛菌种进行复筛
氢细菌材料
菌种为大连理工大学花园土壤。筛选培养基(μ/g/L),NH4Cl 2.0,Na2HPO4 0.75,KH2PO4 0.25,MgSO4 0.3,V(H2):V(O2):V(CO2)=7:1:1,pH=7。
氢细菌筛选流程:
1) 采用置换排气法配气:NADPH NADH NADH H2 CO2 H2 SHase SHase NAD+ 细胞膜 细胞质 ADP+Pi ATP Cytb CoQ 维生素K2 Cytc Cyta/a3 O2 琥珀酸 PHase PHase——颗粒状氢化酶 SHase——可溶性氢化酶
2)斜面和平板培养条件下的配气:先采用置换配气法使缓冲瓶内充满一定 比例的气体,真空干燥器在无菌室灭菌后,将划线斜面或平板放人其中,用真空泵将真空干燥器抽成真空,然后与缓冲瓶连接。
3) 菌种的筛选:在250 mL血浆瓶内装入30 mL液相培养基,用硅胶塞密 封,灭菌,用无菌注射器接土壤上清液,再通过配气装置充入混合气, 30℃摇床振荡培养,3~4 d为一个富集周期,之后挑取单苗落划线,恒温培养8—10 d后获菌种斜面。
4) 培养条件的优化:每一培养条件的考察均采用筛选培养基.只改变待考 察条件,测定培养液。
5) 蛋白含的测定:用过硫酸钾氧化-紫外分光光度法 .
6) 气相色谱分析
氢细菌培养方法
对筛选好的菌种根据不同类型,
可以用几种不同的方式培养,
每篇文献中采
用的方法都不完全一致,这里,经过总结,给出以下流程。
1)通气比例的确定:气相比例对氢细菌生长代谢影响最大,因此实验前
要对最佳通气比例进行测定。
2)培养基的制备:根据不同电子受体配制培养基,注意保证二氧化碳作为
唯一的碳源。
3)供氢装置:外部供氢法和内部供氢法(电解法)
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