请问我的RNA跑琼脂糖凝胶100V，5分钟，只有的一百bp以下有条非常亮的粗条带，是怎么回事？

应该是你的RNA已经降解了，而且可能不是跑胶过程中降解的。

另外，5分钟是不是有点时间太短了，可能都还没有跑开，你可以将电压调到120V 跑10~15min试试。如果RNA无降解的话，应该在2000和1000左右有两条带，100bp一下有一条较淡带或没有带。

祝顺利！

琼脂糖凝胶电泳跑成这样是怎么回事？

从你的描述和图能看出几个问题

1.75V电压，300mA的电流，这电流是不是有点太大了？可能需要更换一下电泳液。

2.你说是提的基因组DNA，这个基因组DNA是多少bp的？1%的胶一般对应的500bp-1000bp左右的目标基因。你这个条带稍微跑出来一点，有可能是目的基因太大，目标基因的大小好歹也得在选用marker的范围之内。

3.胶配的倒是挺好的，不过你左右两条marker跑的速度怎么不一样快？是不一样的marker么？要是一样的，那我收回胶配的挺好的这句话。

4.我看有的条带很弥散，我觉得可能是电流大导致的发热大，最终是目标条带不见了。

根据我多年的经验，少年，你的胶背景亮说明你的UV开得太亮了，正常时候不需要这么强光就能看到条带。

从你胶的样子可以看出，你跑胶的时间太长了，看样子你用的是SYBR green，这种染料在你电泳的时候是会向条带相反方向移动的，跑时间太长，造成你的胶这样下面一部分已经看不到marker和背景亮光了。而过长时间跑胶造成的温度升高（拿在手里热乎乎的软软的，听起来像便便。。。），使胶中的样品和染料很多都扩散出去了，造成你的maker和条带整个的不够亮。

从你marker的位置可可以看出你跑胶的时间很长，因为最大的条带的位置比较低了。

即使你的背景这么强，也可以看出在你样品孔的下方很近的地方有条带，我不知道你样品的大小和来源，但是可以给出以下几个可能原因：

你的loading buffer不正确，造成样品条带异常移动

最可能原因是你的样品中DNA就那么大。如果你是提取质粒的话，你做错某步，把细菌的核DNA提取出来了，所以才那么大。你做错的可能是裂解那步，裂解时间超过5分钟了或者你剧烈混合裂解液和细菌了，只有invert就可以了。

你上样量也要保证，测一下浓度，一般200ng的条带就非常亮了。

跑胶时候，电压一般80-120，可以低，也可以高到200，但是室温下推荐80-100。时长20-60分钟为宜，一般推荐30分钟，不过你可以跑一段时间拿出来UV照一下，这时候你可以看到条带，如果分得不够开，再放回去跑一会就好了。如果实在需要长时间跑，放4度跑。